Twitter definiert die Zielgruppe nicht klar. Hier können Menschen jeden Alters in Kontakt treten und/oder Nachrichten veröffentlichen.
Eine Einteilung in Kategorien wird nicht durchgeführt. Da es lediglich um die Frage „What are you doing?“ geht, kann man die Seite als aus einer einzigen Kategorie bestehend einordnen. Inhalt ist also das Leben der Individuen. Das Verhalten, die Freizeit, der Beruf, aber auch das teilweise sinnlos erscheinende Geplauder sind Themen auf dieser Homepage.
Der Service beschäftigt sich mit dem alltäglichen Leben das die Teilnehmer posten. Dies geschieht unter Zuhilfenahme der schriftlichen Kommunikation per Handy oder Internet. Bilder spielen eine untergeordnete Rolle. Hier kommen Bilder nur als Emoticons wie Smileys vor in Form von Sonderzeichen und Buchstaben oder als Avatare. User können ihre Nachrichten je nach Wunsch zum Beispiel mit einem Bild von sich selbst oder einem Comic illustrieren, das bei jedem von ihnen geschriebenen Beitrag angezeigt wird.
Die Kommunikation erfolgt zumeist auf Englisch, manch einer postet jedoch auch in der Landes- bzw. Muttersprache. Auditive Formate werden nicht genutzt. Diesen Service kann jeder nutzten, der den Nutzungsbedingungen zustimmt und mindestens 13 Jahre alt ist. Zum Beispiel muss man zustimmen keinen User direkt anzugreifen, keine illegalen Inhalte zu verbreiten oder auch, dass man keine Mails an User versendet die als „Spam“ gelten. Zusätzlich dazu zeigt man sich für alles selbst verantwortlich was man publiziert oder unter dem eigenen Usernamen publiziert wird. Twitter nimmt sich die Rechte heraus, jeden Inhalt zu ändern oder zu löschen, ohne Gründe bekannt geben zu müssen, auch dem stimmt man in den „Terms of Service“ zu.

Wenn die „Hürde“ der Registrierung abgeschlossen und somit übersprungen ist, kann man nun per Handy oder Internet Nachrichten in einer Länger von 140 Zeichen versenden. So wird das Mobiltelefon oder jedes Gerät, das die Möglichkeit zu einem Internetzugang hat zum Kanal um eine Nachricht zu versenden und seinen Freunden und/oder der Öffentlichkeit mitzuteilen was man gerade erlebt.

Je nachdem wann man diese Nachricht gesendet hat erscheint sie auf der Startseite. Eine Reihung erfolgt vertikal von neu bis älter. „Updating live every four minutes.” (Twitter 2007: o.S.). Alle vier Minuten kann man mit diesem Service erfahren, wie das Leben anderer Menschen aussieht.